hek293细胞系，又名hek293,hek293,293细胞系，是1973年由人类胚胎产生的293细胞。正如名称所示，它们是由人体胚胎肾细胞产生的典型细胞系。起初，这些细胞是从正常流产的胎儿中合法提取的。长期以来，人们一直认为，HEK293细胞系是由成纤维细胞或上皮细胞转化而成。虽然肾脏中含有大量这种物质，但是最初的腺病毒转化效率很低。所以研究人员开始怀疑HEK293产生细胞系是否存在异常。然后我们通过一系列的实验来分析细胞基因组和转录体。HEK293具有与肾上腺细胞hek293相似的形态，具有多种神经元特征。结果表明HEK293细胞在体外可作为肾上腺细胞的模型，而非典型肾细胞。
HEK293在细胞结构上属于亚三倍体，只包含了人类单倍体配子染色体数的1/3。另外，胚胎肾细胞是在组织培养中生长的。迄今为止，HEK293细胞已经被广泛应用于细胞研究领域多年。他们的生长是比较可靠的，而且更容易转染。
在培养过程中，HEK293细胞能直接生长并定向生长。它们常用于基因表达过程中的宿主。另外，该细胞系通过磷酸钙法等多种方法进行转染也得到了广泛的应用，转染效率接近100%。
一、HEK 293细胞系的应用：
该细胞株HEK293可用于许多研究。比如，它可以用来研究药物对钠通道的影响，可以确定RNA干扰系统，以及蛋白中的核输出信号等等。
具体地说，HEK293细胞是用来繁殖腺病毒载体。使用病毒来进化目标基因并将其转移到细胞内是一个有效的方法。但是，由于病毒具有病原体的特征，因此也存在一定风险。这就需要一个表达缺失基因的细胞系，以获得这种病毒载体的复制。因为HEK293细胞含有很多腺病毒基因，所以用它们来传播腺病毒载体是很理想的。已删除E1,E2)。
由CRISPR/Cas介导的HEK293细胞四基因敲除蛋白和病毒产量增加。Cas9利用gRNA识别靶序列，引导Cas9内切酶切断PAM上游通道，造成靶位DNA双链断裂。为修复DSB，细胞利用其自身的DNA修复机制，通过同源定向修复(HDR)或非同源末端连接(NHEJ)来增加、删除或替换DNA序列片段。
研究者们通过CRISPR/Cas技术敲除4个促凋亡基因(Caspase3,Caspase6,Caspase7和AIF1)，成功地制造了HEK293细胞的抗凋亡细胞系。凋亡在病理生理学中扮演着重要角色。但是，从生物制药的观点来看，宿主细胞在病毒包装或蛋白表达过程中的主动凋亡并不可取，因为这会降低病毒或蛋白的生产效率。编辑过的细胞株促凋亡蛋白的表达水平比野生型细胞高，携带这些蛋白的病毒包装也更有效。该基因编辑细胞不仅能产生能够产生凋亡诱导蛋白和病毒的抗凋亡细胞系，还能为构建其它抗凋亡细胞系提供途径。以HEK293为基础构建了稳定表达红血球生成素的表达系统。
HEK293细胞不仅具有人糖基化谱生成和建立调控记录的能力，而且还具有许多优点，是一种特别吸引人的重组蛋白表达系统。第一，羧基化作用于谷氨酸，硫酸作用于酪氨酸。二是操作简便，通过基因的瞬时表达能迅速产生重组蛋白。三是适用于稳定生产重组蛋白。有些研究者使用CRISPR/Cas9系统生成了GLUL-KO-HEK293细胞系，对GLUL基因组进行定向定位，生成了HEK293细胞，生成了EPO，并发现了重组促红细胞生成素在人体中稳定表达的机制。
二、Cas9基因敲除HEK293细胞株的策略
根据客户需求，结合靶基因情况设计敲除方案。
在小片断敲除方案中，gRNA位于外显子2两端的内含子中，敲除外显子编码碱基为非3倍数，敲除后可以产生移码。
去除编码敲除方案，将gRNA置于外显子上，缺失的碱基为非3倍数，去除后可发生移码突变。
采用大段敲除方案，将编码序列的全部基因敲除，实现大段敲除。
三、服务流程及质量控制:
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